青年鸡一人单独操作，产蛋鸡两人或三人操作，一人注射，一人或两人抓鸡。操作复杂，劳动量大，易造成死亡，疫苗及吸收因素会影响屠宰胴体品质等。接种过程中，应严禁疫苗接触鸡的其他部位，否则易引起喉气管炎。
一、皮下注射法
皮下注射是将疫苗注入皮肤与肌肉之间的组织，疫苗被机体缓慢吸收后即可获得免疫力。可分为颈部、胸部、腿部皮下注射等。
颈部皮下注射操作时，注射部位选择在颈部正中线的下1/3处，一手食指和拇指分开在鸡头部横向由下而上将皮层挤压到上面提住拉高，不能只拉住羽毛，使表皮和颈部肌肉分离，另一手将注射器针头向着背部方向，以小于30°的角度刺入捏起的皮下，缓慢注入疫苗。
注射正确时可感到疫苗在皮下移动，推注无阻力感。进针位置应在颈部背侧中段以下，针尖不伤及颈部肌肉骨头，否则易引起肿头或颈部赘生物生长。同时针体以与头颈部在一直线为宜，可减少刺穿机会，若针头刺穿皮肤，则有疫苗溶液流出，可看到或触摸到。发现刺穿现象应补注。
皮下注射适用于马立克氏病疫苗及各种灭活苗免疫。优点是颈部由于皮下活动区域较大，皮下血管丰富，油乳剂灭活疫苗吸收迅速，免疫效果好，产生的抗体维持时间较长，是最常用的注射方法，也是油乳剂灭活疫苗免疫接种的最佳方法；缺点是如果注射不当，会造成严重不良后果。
二、肌内注射法
肌内注射法根据注射部位的不同，可分为胸部肌内注射、腿部肌内注射和翅根肌内注射等3种注射方法。根据被注射鸡只大小、日龄、用途等选择适合的肌内注射方法。
1、胸部肌内注射操作方法。一手持双翅根固定鸡只，鸡只平放使胸部朝上，胸部上1/3处，龙骨突两侧，注射针距龙骨2～3厘米，锁骨2～3厘米，在胸部肌肉厚实处进针，进针方向与胸骨平行，与胸肌呈30°角刺入。雏鸡刺入深度为0.5～1厘米，较大鸡为1～1.5厘米，将药液注入浅层肌肉。
2、翅根肌内注射操作方法。一手持双翅翅根，暴露翅根部。在鸡翅膀根部内侧肌肉部位，将注射器针头平行翅膀骨骼垂直于身体刺入，注入药液后，观察药液是否倒流，轻按针孔。注意翅根部中央存在血管，不要在中央进针及作为进针方向。
3、腿部肌内注射方法。青年鸡一人单独操作，产蛋鸡两人或三人操作，一人注射，一人或两人抓鸡。抓鸡人固定好鸡并充分暴露鸡腿部肌肉，在正后侧腿部上1/3处进针，针头呈30°倾斜，朝背部方向刺入腿部肌肉，注射完毕轻轻把鸡放回笼内。
肌内注射法的优点是肌肉内神经分布少，吸收速度较快，疼痛刺激小，适用于各种灭活疫苗；缺点是抗体形成快，维持时间少。操作复杂，劳动量大，易造成死亡，疫苗及吸收因素会影响屠宰胴体品质等。
三、刺种法
将疫苗按规定剂量稀释后，充分摇匀，用蘸笔（文具店有售）或接种双峰刺种针蘸取疫苗，在鸡翅膀内侧无血管处刺种1～2下，此法适用于鸡痘弱毒苗的接种，但需3天后检查刺种部位，若有小肿块或红斑则表示接种成功，或者7天后检查刺种部位是否结痂，结痂说明刺种成功，否则需重新刺种。 图4-7 双针头刺种免疫
四、涂擦法
涂擦法主要用于特殊情况下鸡传染性喉气管炎强毒的免疫。方法是将1000只剂量的疫苗加入30毫升生理盐水稀释，捉鸡倒提，用手捏腹使肛门黏膜外翻，用消毒的棉签或小刷子蘸取疫苗，直接涂擦在泄殖腔的黏膜上，使黏膜发红为止。接种过程中，应严禁疫苗接触鸡的其他部位，否则易引起喉气管炎。擦肛后4～5天，可见泄殖腔黏膜潮红，否则应重新接种。
五、喷雾接种法
喷雾免疫是一种常用的蛋鸡免疫形式，主要在鸡大群免疫时应用。省时、省力，对散养或笼养的鸡免疫都很方便；可诱导鸡的呼吸道局部免疫力的产生，同时刺激机体产生循环抗体；使鸡群产生良好一致的免疫效果，而且产生免疫力的时间比其他方法快，适于较大型鸡场。
按要求将疫苗稀释后，用专用喷雾器将药液均匀地喷于鸡舍内。喷雾前先关通风孔，将1000只剂量的疫苗加蒸馏水150～300毫升稀释，用纱布过滤，用喷雾器（枪）喷于500只鸡的鸡舍空中，要求喷雾均匀，喷头离鸡1.5米，喷完20分钟打开通气孔，免疫后的饲料中添加抗生素防止气囊炎。此法适合鸡瘟Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ系，传支疫苗接种。
喷雾免疫不适用于30日龄内的雏鸡。比较适合8周龄以上鸡免疫，因为8周龄以内鸡的免疫系统发育不健全，容易产生一定的免疫副反应，所以在小鸡阶段进行喷雾免疫要更加小心。缺点是对禽群有一定干扰，往往会加剧慢性呼吸道病及大肠杆菌引起的气囊炎；对操作的技术要求比较严格，操作不当时往往达不到预期的免疫效果甚至可引起免疫失败，导致严重的疫苗反应。
